ELISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)原理:免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發(fā)生的高選擇性高特異性識別和結(jié)合原理,對待測抗體或者抗原進(jìn)行分析測定的方法,酶聯(lián)免疫吸附分析(下稱ELISA)是免疫分析的一種,分三個(gè)部分組成:免疫識別,信號輸出和數(shù)據(jù)處理。
影響酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISA結(jié)果的因素有哪些?
主要包括檢測板、包被緩沖液、捕獲抗體、封閉緩沖液、靶抗原、檢測抗體、酶偶聯(lián)物、洗滌液、底物、信號檢測的質(zhì)量和完整性都會(huì)干擾正確的 ELISA 測試。一些可能干擾測試的因素如下:
1. 微孔板:孔的形狀和質(zhì)量、板的材料、潛在的預(yù)激活、均勻或不均勻的涂層
2.緩沖液:pH、污染
3.捕獲和檢測抗體:孵育時(shí)間、溫度、特異性、滴度、親和力
4.封閉緩沖液:交叉反應(yīng)、濃度、污染
5.靶抗原:構(gòu)象、穩(wěn)定性、表位
6.酶結(jié)合物:類型、濃度、功能、交叉反應(yīng)
7.清洗:污染、頻率、體積、持續(xù)時(shí)間、成分
8.基板:微孔板的質(zhì)量、材質(zhì)
9.檢測:檢測相關(guān)的儀器設(shè)備:比如:分光光度計(jì)、讀板機(jī)等相關(guān)因素
10. 誤差:人為誤差(實(shí)驗(yàn)步驟不規(guī)范等)