人elisa試劑盒操作過程:
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;人elisa試劑盒孔各加不同濃度的標準品50μL。
3、待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL。
4、隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)參與辣根過氧化物酶(HRP)符號的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6、全部孔參與底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、全部孔參與停止液50μL,15min內(nèi),在450nm波利益測定各孔的OD值。
人elisa試劑盒實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培育,而不適用于人elisa試劑盒培育,可運用滴片法;
2.所運用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制作,并通過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片十分薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.假如需要更多成長狀況共同的細胞,可以運用較大的培育皿,但不宜過大,以避免培育液的浪費和添加污染機率;
5.假如細胞貼壁成長才能較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然曬干。