更新時(shí)間:2023-10-26
K599 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10是采用大腸桿菌經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,-70℃保存3個(gè)月轉(zhuǎn)化效率可保持在90%以上。
K599 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10以下是的訂購信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
K599 感受態(tài)細(xì)胞100ul*103. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
K599 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時(shí),由于營(yíng)養(yǎng)不足,陽性克隆生長(zhǎng)變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長(zhǎng)、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
SAA 大鼠血清淀粉樣蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
GMP-140 大鼠血漿α顆粒膜蛋白 規(guī)格: 48T/96T
HO-2 大鼠血紅素氧合酶2 規(guī)格: 48T/96T
HO-1 大鼠血紅素氧合酶1 規(guī)格: 48T/96T
ADAMTS13/vWF-cp 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶 規(guī)格: 48T/96T
VWF 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 規(guī)格: 48T/96T
BK 大鼠血管舒緩激肽 規(guī)格: 48T/96T
ANG-R-Tie2 大鼠血管生成素受體Tie2 規(guī)格: 48T/96T
ANG-R-Tie1 大鼠血管生成素受體Tie1 規(guī)格: 48T/96T
ANG-4 大鼠血管生成素4 規(guī)格: 48T/96T
ANG-2 大鼠血管生成素2 規(guī)格: 48T/96T
ANG-1 大鼠血管生成素1 規(guī)格: 48T/96T
ANG 大鼠血管生長(zhǎng)素 規(guī)格: 48T/96T
VCAM-1/CD106 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T
VEGFR-2 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2 規(guī)格: 48T/96T
VEGFR-1 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1 規(guī)格: 48T/96T
VEGF-D 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D 規(guī)格: 48T/96T
VEGF-C 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C 規(guī)格: 48T/96T
VEGF-B 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B 規(guī)格: 48T/96T
VEGF 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
ACE 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 規(guī)格: 48T/96T
aGT 大鼠血管緊張素原 規(guī)格: 48T/96T
ANG-Ⅱ 大鼠血管緊張素Ⅱ 規(guī)格: 48T/96T
Ang-Ⅰ 大鼠血管緊張素Ⅰ 規(guī)格: 48T/96T
VIP 大鼠血管活性腸肽 規(guī)格: 48T/96T
BrdU 大鼠溴脫氧核苷 規(guī)格: 48T/96T
ASD 大鼠雄烯二酮 規(guī)格: 48T/96T
Smad7 大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7 規(guī)格: 48T/96T
Smad1 大鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子 規(guī)格: 48T/96T
NN-T4 大鼠新生甲狀腺素 規(guī)格: 48T/96T
K599 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 ELISA Kit,48T/96T 大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 48T/96T
CT-1 大鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1 規(guī)格: 48T/96T
cTnT 大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T 規(guī)格: