更新時(shí)間:2023-10-26
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10菌株一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株。其φ80lacZΔM15基因的產(chǎn)物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)a互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10以下是的訂購(gòu)信息儲(chǔ)存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(轉(zhuǎn)化效率較高,*次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*103. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項(xiàng)
1. 加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10;質(zhì)粒不純或存在乙醇等有機(jī)物污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級(jí)。
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102. 混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時(shí),由于營(yíng)養(yǎng)不足,陽性克隆生長(zhǎng)變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量。
4. 濃度不應(yīng)高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長(zhǎng)、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入Ti質(zhì)粒篩選抗生素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但Ti質(zhì)粒篩選抗生素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮這些抗生素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。
HSP-40 雞熱休克蛋白40 規(guī)格: 48T/96T
HSP-20 雞熱休克蛋白20 規(guī)格: 48T/96T
IgG 雞免疫球蛋白G 規(guī)格: 48T/96T
IgE 雞免疫球蛋白E 規(guī)格: 48T/96T
IgA 雞免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
Irna 雞免疫核糖核酸 規(guī)格: 48T/96T
IgY 雞卵黃免疫球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
JE IgG 雞流行性乙型腦炎抗體IgG 規(guī)格: 48T/96T
sEPCR 雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 規(guī)格: 48T/96T
sICAM-1 雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T
sE-selectin 雞可溶性E選擇素 規(guī)格: 48T/96T
AT-Ⅲ 雞抗Ⅲ抗體 規(guī)格: 48T/96T
AmAC-1 雞巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1 規(guī)格: 48T/96T
bFGF 雞堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
MYO/MB 雞肌紅蛋白 規(guī)格: 48T/96T
SIgA 雞分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
PPP 雞蛋卵黃高磷蛋白磷酸肽 規(guī)格: 48T/96T
HSVⅡ-Ab 雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體 規(guī)格: 48T/96T
PRL 雞催乳素 規(guī)格: 48T/96T
FSH 雞促卵泡素 規(guī)格: 48T/96T
LH 雞促黃體激素 規(guī)格: 48T/96T
IC 雞傳染性鼻炎抗體 規(guī)格: 48T/96T
C3SP 雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物 規(guī)格: 48T/96T
DEV 雞病毒性腸炎病毒 規(guī)格: 48T/96T
EGF 雞表皮生長(zhǎng)因子 規(guī)格: 48T/96T
ALV-AG 雞白血病病毒抗原 規(guī)格: 48T/96T
PD 雞白痢抗體檢測(cè) 規(guī)格: 48T/96T
IL-4 雞白介素4 規(guī)格: 48T/96T
IL-3 雞白介素3 規(guī)格: 48T/96T
IL-2 雞白介素2 規(guī)格: 48T/96T
IL-1β 雞白介素1β 規(guī)格: 48T/96T
IL-18 雞白介素18 規(guī)格: 48T/96T
IL-17 雞白介素17 規(guī)格: 48T/96T
IL-1 雞白介素1 規(guī)格: 48T/96T
IFN-γ 雞γ干擾素 規(guī)格: 48T/96T
β-lactamase 雞β內(nèi)酰胺酶 規(guī)格: 48T/96T
IFN-β/IFNB 雞β干擾素 規(guī)格: 48T/96T
α-glucosidase 雞α葡萄糖苷酶 規(guī)格: 48T/96T
IFN-α 雞α干擾素 規(guī)格: 48T/96T
NAG 雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 規(guī)格: 48T/96T
Ar 1193 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10 PAL 雞L苯解氨酶 規(guī)格: 48T/96T
CRP 雞C反應(yīng)蛋白 規(guī)格: 48T/96T
BF 雞B因子 規(guī)格: 48T/96T
5-NT 雞5核苷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
17-KS 雞17-酮類固醇 規(guī)格: 48T/96T
17-OHCS 雞17羥皮質(zhì)類固醇 規(guī)格: 48T/96T