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稻芽染料法PCR鑒定試劑盒說明書

更新時間:2023-10-30

簡要描述:

稻芽染料法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關(guān)產(chǎn)品 -(4-氨基丁基)-N-乙基異魯米諾66612-29-1 ABEI 液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂) Thioglycollate Medium(without Agar)
1,3-茚二酮606-23-5 1,3-Indanedione 液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT) Thiolglycollate

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特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

稻芽染料法PCR鑒定試劑盒說明書

英文名稱

oryzae germinatus

貨號

BH-P99317

使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 76,5,43,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
儲存條件:
14或-20樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
T-47D人管癌細胞 T-47D human breast duct carcima cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS瑞格非尼Regorafenib(BAY 73-4506)質(zhì)量規(guī)格:>99%,多激酶抑制劑

TSLP Protein Mouse 重組小鼠 TSLP 蛋白 (His 標簽)MK-2866Ostarine,GTx-024質(zhì)量規(guī)格:>99%

人腎小管上皮細胞;HKC 人肺大靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mLXTT鈉鹽XTT  salt質(zhì)量規(guī)格:>90%,進分

小鼠成纖維細胞MLF二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標準品)(2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

NP Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
CM-M038小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標準品)Harmaline;Dihydroharmine質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞KC-5103Tifluadom/KC-5103質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0910 成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL*/*Valacyclovir HCl質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

前列腺平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)*/*(標準品)Valacyclovir HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

CD200 Others Cymolgus 食蟹猴 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) *Vecuronium Bromide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
大鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細胞(RM)(5×105)赤芝酸ELucidenic acid E質(zhì)量規(guī)格:HPLC97%

非洲綠猴腎細胞;CV-1利克飛龍Licofelone質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞瘤瘤株;G422 小鼠膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL靈芝1CGaderenic acid C質(zhì)量規(guī)格:>95.0%HPLC

細胞名稱 種屬生物胞素Biocytin質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分

VWC2 Others Human VWC2 / Brorin 人細胞裂解液 (陽性對照) PU-H71PUH71質(zhì)量規(guī)格:>98%,HSP90抑制劑
稻芽染料法PCR鑒定試劑盒說明書POSTN Others Human OSF2 / POSTN 人細胞裂解液 (陽性對照) 1--8-奈酚-3,6-二磺酸鈉shēng huà shì jì容量:25

腦動脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)3-本基-1-炳醇;γ-本炳醇;輕化肉桂醇;3-本炳醇;γ-羌基炳基本 3-Phqnyl-1-propcl;xy7cinncMic clcohol;xy7cinncMyl clcohol;3-Phqnylpropcl;3-Phqnylprop

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