更新時間:2023-11-02
乙型腦炎病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)公司相關產(chǎn)品LS174T 結腸癌細胞氟喹酮()>98%,AfloqualoneMDA-MB-231癌細胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-231 L-15+10% Hyclone FBS鈉 SA-NA>99%,BRSufacetamide TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto /
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:乙型腦炎病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
編號:BH-P96581
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
牛腎細胞;MDBK(BVDV-free)()Methimazole含量測定
小鼠肉瘤瘤株;S180 小鼠表皮角化細胞*培養(yǎng)基 100mL枸櫞酸氯米芬()Clomiphene 含量測定
羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 Human甲磺酸雙氫毒堿()Dihydroergotoxine mesylate含量測定
TNFRSF25 Others Human TNFRSF25 / DDR3 / APO3 細胞裂解液 (陽性對照) 6-醛基異麥冬黃烷酮A()6-Aldehydoisoophiopogonanone AHPLC≥98%,
前列腺上皮細胞HPEpiC()Chlorprothixene檢查
CN3 Others Mouse 小鼠 Coactin 3 / CN3 細胞裂解液 (陽性對照) 刺芒柄花素>98%,BRFormononetin
大鼠晶狀體上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL大豆素,()HPLC>98%,分析Daidzein
EB (NBL-4)牛胚氣管細胞 EB (NBL-4) of bovine embryo acheal cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS巴馬汀氯化物一水合物(分析)分析Palmatine chloride hydrate
IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 標簽)BSA[=N,O-雙(基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC))>75.0%(GC)N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide
NCI-H446(小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa(細胞)BSTFA[=N,O-雙(基硅基)三氟代乙酰胺](>95.0%(GC),用于氣相色譜)
乙型腦炎病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)NCI-H209 小細胞肺癌細胞O-去甲美國進口O-Desmethyl Carvedilol
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤4'-羥苯基美國進口4'-Hydroxyphenyl Carvedilol
大鼠主動脈平滑肌細胞(S)-(-)-5'-芐氧基苯基美國進口(S)-(-)-5'-Benzyloxyphenyl Carvedilol
惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92 [NK92] 胰島β細胞*培養(yǎng)基 100mL(R)-(+)-O-去甲美國進口(R)-(+)-O-Desmethyl Carvedilol
永生化細胞;CNLMG-B5537LC5-甲基胞嘧啶 >98%,BR5-methylcytosine
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。