更新時(shí)間:2023-11-02
禽腦脊髓炎病毒(AEV)核酸檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HIMEC)( 5×105 ) RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞 RattusL->99%,BRL-Glutamine單核細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)羅氟司特含量≥99.0%(HPLC)RoflumilastTNFRSF19 Others Human TNFRSF19 / OY 細(xì)胞裂
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:禽腦脊髓炎病毒(AEV)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96749
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Promocell C-28052 DC Generation Medium DXF,樹突狀細(xì)胞生成培養(yǎng)基DXF(即用型) 250ml芒果苷Mangiferin≥90%,BR
牙周膜成纖維細(xì)胞總RNAHPLF NA毛蕊異黃酮()CalycosinHPLC≥98%,
ITGAX & ITGB2 Others Human ITGAX & ITGB2 Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 毛蕊異黃酮苷()Calycosin-7-O-β-D-glucosideHPLC≥98%,
KYSE410 食管癌細(xì)胞沒食子兒茶素()GC; (-)-gallocatechinHPLC≥98%,
CL-0337FO(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2沒食子兒茶素沒食子酸酯()GCG;(−)-Gallocatechin gallateHPLC≥98%,
IGFBP5 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 間甲基紅指示劑m-Methyl red
脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-ad紫脲酸銨(IND)INDMurexide
SK-MES-1細(xì)胞,肺癌細(xì)胞 膀胱鱗癌細(xì)胞,ScaBER細(xì)胞 前脂肪細(xì)胞-皮下HPA-s卡立普多>99%,USP,BRCarisoprodol
水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)卡立普多()HPLC>98%,Carisoprodol
MICB Others Human MICB 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) > 99%,EPCarvedilol
禽腦脊髓炎病毒(AEV)核酸檢測(cè)試劑盒上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL表告依春()HPLC≥98%,Epigoitrin
TE671 subline No.2細(xì)胞,橫紋肌肉瘤細(xì)胞 化膿性鏈球菌 轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1表沒食子兒茶素()HPLC≥98%,(−)-Epigallocatechin/EGC
CCL4 Protein Human 重組 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 標(biāo)簽)表小檗堿()HPLC≥98%,Epiberberine
LS-174T(結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 PRNP / Prion 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 濱蒿內(nèi)酯()HPLC≥98%,Scoparone
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1變色酸鈉,鉻變酸二鈉ARChromotropic acid di salt dihydrate
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。