更新時間:2023-11-08
柯薩奇病毒B3型核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品3T3L1細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(前脂肪) 癌細(xì)胞,ER-30細(xì)胞 體外管腔形成分析試劑盒IVTFA3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))3,3'-Bithiophene>98.0%(GC)非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-12,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))2,1,3-Benzothiadiazole>99.0%(GC)
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:柯薩奇病毒B3型核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96398
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1()Oxiconazole NitrateHPLC法含量測定
Ishikawa, 內(nèi)膜癌細(xì)胞系普瑞巴林()PregabalinHPLC法含量測定
腦瘤細(xì)胞;SF767 大鼠腮腺細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL(S)-(+)-苯乙醇酸(普瑞巴林雜質(zhì))()[(S)-(+)-MandelicAcid] (Pregabalin impurity)供檢查用
腎系膜細(xì)胞生長添加物MCGS()D-Sorbitol供檢查用
TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙二醇()Ethylene Glycol供檢查用
PA-1細(xì)胞,卵巢畸胎瘤細(xì)胞 Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎,HEK-293細(xì)胞 心肌細(xì)胞Many types of cells 5 ×105方(1ml)TRIS,1M,pH8.0Tris溶液生物技術(shù)級透明無色液體RTsigma
山羊皮膚細(xì)胞;WGS1λ型角叉菜膠 λ-Carrageenan 9000-7-1 1G 通用試劑
S100B Others Human S100B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 溴化金 GOLD(III) BROMIDq 1094-8-7
CL-00074T1(小鼠癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2etxylcaprate羊蠟酸乙酯100TCP,26.2%
EFNA5 Others Rat 大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 110-17-8富馬酸;反二酸;;紫堇酸;1,2-二羧酸FuMaric Acid;Boletic acid;Lichenic acid;trans-1,2-etxylenedicarboxylic acid
柯薩奇病毒B3型核酸檢測試劑盒THBD Others Rat 大鼠 Thrombomodulin / THBD 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 曲扶胸甙,英文名或英文縮寫:Trifluorothymidine,級別:高,98%,規(guī)格:1克
腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)3-[(3-膽酰安炳基)二基安]-1-炳磺醋水合物 98% 3-((3-CHOLcMIDOPROPYL)DIMqTHYLcMMONIO)-& 3133-04-0
Raji細(xì)胞,Butt`s瘤細(xì)胞 C57小鼠色素瘤瘤株,ME細(xì)胞 腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物HRPTEpiCLBSALOWENODOTOXIN白蛋白,低內(nèi)生物技術(shù)級白色至淡黃色粉末COLDsigma
NCI-H23(非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硼酸shēng huà shì jì容量:RT10克
CCD-1095Sk(浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株;L615Pronase 250mg/1g Roche分裝