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單體親和素磁珠

更新時間:2023-11-09

簡要描述:

單體親和素磁珠可用于免疫沉淀、細胞分選,以及從細胞裂 解液或雜交反應中快速一步捕獲生物化分子,如DNA、RNA、抗體或蛋白質(zhì)。

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公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

商品屬性

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

P-PR1059

單體親和素磁珠

1ml10mg/ml

親和素(或鏈霉親和素)和生物su之間表現(xiàn)的相互作用,是已知的非共價相互作用的一種。親和素、鏈霉親和素、 單體親和素及其類似物已成為探針研究實驗中強大的親和配體工具,被廣泛應用于生化分析、診斷、親和純化和藥物遞送。Monomer Avidin Magnetic Beads是一種高度均勻的超順磁性微球,表面包裹著高密度的超純(>97%)亞單位單體親和素。單體親和素源自天然四聚體蛋白,它保留了與天然親和素相同的生物su結(jié)合特異性,但其生物su結(jié)合親和力會有顯著降低(kD=~10-8 M)。因此,通過使用溫和的洗脫條件,例如含有2 mM 生物su的緩沖液,就可以很容易地從單體親和素中洗脫結(jié)合的生物su化分子。本款磁珠經(jīng)過專門設計、測試和質(zhì)量控制,可用于免疫沉淀、細胞分選,以及從細胞裂 解液或雜交反應中快速一步捕獲生物su化分子,如DNA、RNA、抗體或蛋白質(zhì)。

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產(chǎn)品特點:
·快捷,簡單的一步法高通量操作;無需純化柱或過濾器,或重復移液、離心等操作
(圖1)
·結(jié)合能力,在溫和的條件下洗脫結(jié)合的生物su化分子
·在溫和的洗脫條件下純化生物su化樣品
·極小的非特異性結(jié)合
·對樣本體積要求低,便于自動化操作
·成本低:只有市場同類產(chǎn)品磁珠價格的一半
·磁珠至少可以重復使用5次
緩沖液

·1x PBS Buffer (0.1 M 磷酸鈉, 0.15 M 氯化鈉; pH 7 ) ·1x Regeneration Buffer (0.1 M Glycine/HCl,pH 2.8) ·1x Blocking/Elution Buffer (2 mM D-生物su溶于 PBS)
磁力分離器(適用于手動操作):根據(jù)實驗時生物樣品的體積,使用者可以選擇以下不同型號的磁力分離器: 8 孔磁力架可以容納 8 個單獨的 1.5-2.0 ml 離心管 ; 24
孔磁力架可以容納 24 個單獨的 1.5-2.0 ml 離心管; 4 孔磁力-15 可以容納 4 個單獨的15ml 離心管; 4 孔磁力架-50 可以容納四個單獨的 50 ml 離心管。
操作過程
操作過程中實驗體積可根據(jù)需要放大或者縮小
提示:在純化生物su化蛋白質(zhì)、多肽和其他分子之前。用戶應將試劑盒中的所有試劑溫度 平衡至室溫,并用雙蒸餾水配制 1x 工作溶液。
1. 輕輕震動裝有磁珠的試劑瓶,直到磁珠懸浮。將 50µl 磁珠轉(zhuǎn)移到新試管中。
提示:客戶應根據(jù)每個實驗粗樣品中生物su化分子的數(shù)量,根據(jù)經(jīng)驗確定的磁珠
使用量。過多的磁珠會導致背景更高;磁珠使用量少會造成產(chǎn)量降低。我們建議純化50μg 生物su化分子添加 50μl 懸浮的磁珠。
2. 將試管放在磁力分離器上1 分鐘。當磁珠沉淀時,去除上清液。取下試管加入四倍 磁珠體積的d2H2O,充分混合。并將試管再次置于磁力分離器上1 分鐘,去除上清 液。
3. 按照步驟2 所述方式,用四倍磁珠體積的1x PBS 緩沖液清洗磁珠。
4. 加入三倍磁珠體積的1xBlocking / Elution Buffer,通過渦旋充分混合,并在室溫下培養(yǎng)5 分鐘。將試管放在磁力分離器上1 分鐘。去除上清液。
5. 加入六倍磁珠體積的1xRegenerationBuffer,通過渦漩充分混合,并將試管放在磁力分離 器上1 分鐘。去除上清液。
6. 加入四倍磁珠體積的1x PBS Buffer,并按照步驟2 所述方式清洗磁珠。這些磁珠可以隨時使用。
提示:必須立即使用磁珠,否則粘合能力將顯著降低。
7. 向磁珠中加入含有生物su化分子的樣品,通過移液器吹吸充分混合,并在室溫下緩慢旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)30-60 分鐘。
8. 將試管放在磁力分離器上,保持試管留在分離器上的同時去除上清液。如步驟 2 所示, 用1x PBS 清洗磁珠,直到在280 nm 處洗脫液的吸光度接近背景水平(OD280<0.05)。
9. 加入一倍磁珠體積的Blocking/Elution Buffer,通過移液器吹吸充分混合,并在室溫下培養(yǎng) 5-10 分鐘,將與磁珠結(jié)合的生物su化分子洗脫下來。

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